В Кремле объяснили стремительное вымирание россиян
П.Ф. Забродский, В.Г. Лим : Патогенез формирования вторичного иммунодефицита при остром отравлении спиртами и хлорированными углеводородами Назад
П.Ф. Забродский, В.Г. Лим : Патогенез формирования вторичного иммунодефицита при остром отравлении спиртами и хлорированными углеводородами
Reports of Military Sciences Academy. 2006. 3 (21). 162-166.
Доклады академии военных наук. 2006. 3 (21). 162-166.

P.F. Zabrodskii, V.G. Lim

THE PATHOGENESIS OF SECONDARY IMMUNODEFICIENCY IN ACUTE
POISONING BY ALCOHOL AND CHLORINATED HYDROCARBONS

This paper presents the results of a study on the pathogenesis of secondary immunodeficiency in
acute alcohol poisoning and chlorinated hydrocarbons.

ПАТОГЕНЕЗ ФОРМИРОВАНИЯ ВТОРИЧНОГО ИММУНОДЕФИЦИТА ПРИ
ОСТРОМ ОТРАВЛЕНИИ СПИРТАМИ И ХЛОРИРОВАННЫМИ
УГЛЕВОДОРОДАМИ

П.Ф. Забродский, В.Г. Лим

В настоящей работе приведены результаты исследования по изучению
патогенеза формирования вторичного иммунодефицита при остром отравлении
спиртами и хлорированными углеводородами


Одной из причин танатогенеза при острых отравлениях спиртами и хлорированными
углеводородами являются инфекционные заболевания и осложнения
(постинтоксикационные пневмонии), обусловленные снижением НРО и показателей
иммунной системы [Лужников Е.А., Костомарова Л.Г., 2000; Забродский П.Ф. и соавт.,
1998, 2002, 2004а, 2004б; Friedman H. et al., 2003]. При этом патогенез изменения НРО и
иммунной защиты в условиях острой интоксикации спиртами и хлорированными
углеводородами в настоящее время изучен недостаточно, не исследована взаимосвязь
нарушений иммунного гомеостаза с перекисным окислением липидов (ПОЛ),
активностью эстераз Т-лимфоцитов, изменением функции гипоталамо-гипофизарно-
адреналовой системы (ГГАС) и симпатико-адреналовой системы (САС) [Быкова А.А.,
Сединина Н.С., 2002; Забродский П. Ф., 1998, 1999б, 2002; Luster M. I. et al., 1987;
Friedman H. et al., 2003].
Целью исследования являлось изучение патогенеза формирования иммунодефицита 2

под влиянием острого отравления спиртами и хлорированными углеводородами (оценка
роли функции коры надпочечников, симпатико-адреналовой системы, перекисного
окисления липидов, активности эстераз Т-клеток в нарушении иммунного статуса)..
Функцию коры надпочечников определяли по уровню кортикостерона в плазме
крови крыс флюорометрическим методом (оценивали уровень неконъюгированных 11-
оксикетостероидов) методом Moor P. et al., (1976) в модификации В.В. Давыдова (1970).
Состояние САС исследовали по содержанию адреналина и норадреналина определяли в
плазме крови спектрофлюориметрически [Филатова Г.Ф. и соавт., 1987]. Активность
ацетилхолинэстеразы (АХЭ) в Т-лимфоцитах крыс определяли методом G.M. Ellman et al.
(1961), выделяя клетки по методике С.В Ширшева (1998). Активность ?-нафтил-АS-
ацетатэстеразы и -нафтилбутиратэстеразы спленоцитов крыс изучали гистохимическим
методом [Хейхоу Ф. Г. Дж., Кваглино Д., 1983]. Состояние перекисного окисления
липидов (ПОЛ) оценивали по суммарной продукции радикалов в крови методом
люминолзависимой хемилюминесценции, активированной форболовым эфиром (0,156
МКм) [Михальчик Е.В. и соавт., 2004], по активности каталазы и пероксидазы,
содержанию малонового диальдегида общепринятыми методами [Валеева И.Х. и соавт.,
2002]. Полученные данные обрабатывались с использованием общепринятых
статистических методов. Расчеты проводились на персональном компьютере с
использованием пакета программ Statgraphics.
Под влияние спиртов и хлорированных углеводородов содержание кортикостерона
в плазме крови через 1-3 ч после интоксикации увеличивалось (табл.1).
Под влиянием острой интоксикации токсикантами через 1 и 3 ч концентрация
кортикостерона увеличивалась соответственно от 1,89 до 2,14 раза и от 1,40 до 1,68 раза,
снижаясь до контрольного уровня через 24 ч. Существенных различий между действием
исследуемых токсикантов не выявлено.
Коэффициенты корреляции (r) между концентрацией кортикостерона в крови и АОК
к ЭБ при остром отравлении крыс метанолом и дихлорэтаном составляли соответственно
-0,715 (p<0,05) [n=8] и -0,727 (p<0,05) [n=9]. Значения r при острых отравлениях
метанолом, дихлорэтаном между концентрацией кортикостерона в крови и реакцией ГЗТ
составляли соответственно -0,708 (p<0,05) [n=8] и -0,794 (p<0,05) [n=9]. Значения r между
АОК к ЭБ, реакцией ГЗТ крыс и концентрацией кортикостерона в крови при острых
интоксикациях этиленгликолем, этанолом, тетрахлорметаном, трихлорэтиленом
находились в пределах от -0,642 до -0,785. При этом r для всех сравниваемых пар 3

показателей после действия токсикантов были достоверны (p<0,05), за исключением
действия этанола (АОК к ЭБ и концентрация кортикостерона).
Таблица 1
Влияние острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами
(0,75 ЛД50) на содержание кортикостерона в плазме крови крыс, нг/мл (М + m)
Токсиканты Контроль Время после воздействия, ч
1 3 12
Метанол

19,7+1,4
40,3+3,3* 28,9+3,1* 14,9+2,7
Этиленгликоль 44,2+4,0* 31,1+2,4* 17,0+1,9
Этанол 38,3+3,1* 30,7+3,3* 20,5+1,8
Дихлорэтан 37,3+4,2* 35,5+3,2* 14,5+2,6
Тетрахлорметан 40,3+3,3* 27,5+3,0* 15,5+2,7
Трихлорэтилен 42,1+4,7* 33,2+2,8* 16,2+2,0
Примечание: в скобках - число животных; в каждой серии использовалось от 7 до 10
крыс; * - различие с контролем достоверно - р 0,05.

Наши эксперименты позволили установить, что под влиянием двукратного введения
кортикостерона в дозах 1,0 и 0,5 мг/кг соответственно с интервалом 2 ч основные
показатели системы иммунитета существенно снижаются. Следует отметить, что введение
кортикостерона в указанных дозах вызывало увеличение данного гормона в крови через 1
ч до 45,2+4,5 нг/мл (n=7), а через 3 ч - до 26,9+3,7 нг/мл (контроль составлял - 19,7+1,4
нг/мл). Данные концентрации приблизительно соответствовали содержанию
кортикостерона в плазме крови после интоксикации спиртами и хлорированными
углеводородами в дозе 0,75 ЛД50.
Супрессия Т-зависимого, Т-независимого антителообразования (число АОК к ЭБ и
Vi-Ag cоответственно), Т-звена иммунитета (реакция ГЗТ), активности ЕКК (ЕЦ) и АЗКЦ
под влиянием экзогенного кортикостерона в дозах 1,0 и 0,5 мг/кг соответственно с
интервалом 2 ч составила соответственно 19,7; 21,7; 18,3; 25,1 и 25,4%. При этом
достоверны только сдвиги числа АОК к ЭБ и ЕЦ (p<0,05). 4

Проведенные опыты доказывают определенную, причем крайне незначительную,
роль кортикостерона в супрессии основных иммунных реакций при остром отравлении
спиртами и хлорированными углеводородами.
Установлено, что r между концентрацией адреналина в крови и АОК к ЭБ, реакцией
ГЗТ при остром отравлении крыс дихлорэтаном составляли соответственно -0,708
(p<0,05) [n=9] и -0,755 (p<0,05) [n=9]. Коэффициенты корреляции при острых
отравлениях другими спиртами и хлорированными углеводородами между концентрацией
адреналина в крови и реакцией ГЗТ, АОК к ЭБ составляли от -0,576 до -0,767. При этом r
для всех сравниваемых пар показателей после действия токсикантов были достоверны
(p<0,05), за исключением действия этанола.
Оценка эффектов катехоламинов в концентрациях соизмеримых с содержанием
адреналина и норадреналина в плазме крови после острой интоксикации спиртами и
хлорированными углеводородами (0,75 ЛД50) показала, что при введении адреналина в
дозе 0,025 мг/кг в крови обеспечивается концентрация соизмеримая с содержанием
адреналина в крови после интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами.
Данная концентрация, составляющая 15,5+2,5 мкг/л, практически не влияла на активность
ЕКК, незначительно повышала ГЗТ и статистически достоверно (p<0,05) увеличивала Т-
зависимый иммунный ответ (число АОК к ЭБ в селезенке), Т-независимый иммунный
ответ (число АОК к Vi-Ag в селезенке), АЗКЦ в 1,38; 1,59 и 1,43 раза соответственно. При
введении крысам норадреналина в дозе 0,025 мг/кг (данная доза обеспечивала содержание
норадреналина в крови - 4,1+0,7 мкг/л - соизмеримое с концентрацией этого медиатора
при действии спиртов и хлорированных углеводородов) происходило незначительное
(p>0,05) увеличение Т-зависимого иммунного ответа (число АОК к ЭБ в селезенке), Т-
независимой иммунной реакции (число АОК к Vi-Ag в селезенке) и АЗКЦ.
Менее выраженная активация иммунных реакций норадреналина связана с тем, что
данный медиатор в отличие от адреналина стимулирует преимущественно ?-
адренорецепторы иммуноцитов. Именно данные структуры, а не -адренорецепторы
обеспечивают активацию лимфоцитов [Rinner I., et al., 1995].
В дозе 1,0 мг/кг адреналин и норадреналин вызывали редукцию всех исследованных
иммунных реакций. Следует отметить, что данная доза адреналина и норадреналина
способна создать концентрацию в плазме крови, превышающую содержание данных
катехоламинов после острой интоксикации спиртами и хлорированными углеводородами
(0,75 ЛД50) более, чем в 30 раз (с учетом биотрансформации, взаимодействия с
рецепторами и выведения эти значения могут быть несколько меньшими). 5

Таким образом, несмотря на выявленную обратную корреляцию между Т-
зависимым гуморальным иммунным ответом, реакцией ГЗТ и концентрацией адреналина
в крови после острого отравления спиртами и хлорированными углеводородами,
иммуносупрессивные эффекты данных токсикантов не связаны с увеличением
концентрации при их остром действии в плазме крови адреналина и норадреналина.
Проведенные нами опыты показали (табл. 2), что под влиянием хлорированных
углеводородов активность ацетилхолинэстеразы (АХЭ) в Т- лимфоцитах тимуса и
селезенки у крыс через 3 сут существенно снижается.

Таблица 2
Влияние острого отравления спиртами и хлорированными углеводородами (0,75
ЛД50) на активность ацетилхолинэстеразы в Т- лимфоцитах тимуса и селезенки у
крыс (мЕд/109
) через 3 сут (M+m)
Токсиканты Тимус Селезенка
Контроль 69,2+7,0 58,4+6,1
Метанол 61,4+6,9 51,0+ 5,7
Этиленгликоль 73,1+7,2 62,4+ 6,0
Этанол 64,7+6,8 55,2+ 5,3
Дихлорэтан 44,5+5,3* 37,5+ 4,5*
Тетрахлорметан 48,0+6,1* 45,0+4,8**
Трихлорэтилен 54,5+5,7** 48,4+4,7**
Примечание: в каждой серии использовалось от 7 до 9 крыс; *; **- различие с контролем
достоверно - р 0,05 (*; ** - для расчета достоверности различий использовали
соответственно t -критерий Стьюдента и непараметрический критерий U Вилкоксона-
Манна-Уитни).

Острое отравление дихлорэтаном, тетрахлорметаном и трихлорэтиленом вызывало
статистически значимое уменьшение активности АХЭ в Т-лимфоцитах тимуса
соответственно в 1,55; 1,49 и 1,27 раза (р 0,05). В Т-клетках селезенки активность АХЭ
снижалась под влиянием дихлорэтана, тетрахлорметана и трихлорэтилена соответственно 6

в 1,56; 1,30 и 1,21 раза (р 0,05). Интоксикация метанолом, этиленгликолем и этанолом на
активность АХЭ Т-лимфоцитов влияния не оказывала.
Несомненно, что ингибирование ацетилхолинэстеразы Т-клеток дихлорэтаном,
тетрахлорметаном и трихлорэтиленом имеет существенное значение в формировании
постинтоксикационного иммунодефицитного состояния. При этом Т-лимфоциты,
возможно, существенно утрачивают свои функции, что приводит к редукции Т-
зависимого гуморального иммунного ответа, снижению цитотоксической активности Т-
клеток. По-видимому, функция К-клеток, обеспечивающих АЗКЦ, также снижается
вследствие ингибирования ацетилхолинэстеразы, так как эти клетки являются потомками
предшественников Т-лимфоцитов [Delves P.J., Roitt I.M., 2000].
Острое действие дихлорэтана, тетрахлорметана и трихлорэтилена вызывало
статистически значимое уменьшение активности ?-нафтил-АS-ацетатэстеразы
соответственно в 1,45; 1,29 и 1,21 раза (р 0,05), а ?-нафтилбутиратэстеразы -
соответственно в 1,42; 1,31 и 1,20 раза (р 0,05). Действие спиртов на активность ?-
нафтил-АS-ацетатэстеразы и ?-нафтилбутиратэстеразы спленоцитов влияния не
оказывало.
Существенных различий в антихолинэстеразной активности отдельных
хлорированных углеводородов не выявлено. При объединении показателей редукции в
единую совокупность для различных ядов установлено, что дихлорэтан в среднем снижал
активность эстераз на 32,9%, а тетрахлорметан и трихлорэтилен - на 21,9% (р 0,05).
Коэффициент корреляции между активностью АХЭ в Т- лимфоцитах тимуса крыс
и АОК к ЭБ, реакцией ГЗТ при остром отравлении крыс дихлорэтаном составляли
соответственно 0,755 (p<0,05) [n=9] и 0,772 (p<0,05) [n=9]. Коэффициент корреляции при
острых отравлениях другими хлорированными углеводородами между активностью
ацетилхолинэстеразы в Т- лимфоцитах тимуса крыс и реакцией ГЗТ, АОК к ЭБ
составляли от 0,767 до 0,805, а между содержанием различных эстеразопозитивных
клеток в спленоцитах и реакцией ГЗТ, АОК к ЭБ - от 0,756 до 0,798. При этом r для всех
сравниваемых пар показателей после действия тетрахлорметана и трихлорэтилена были
достоверны (p<0,05).
Проведенные нами эксперименты свидетельствуют о том, что под влиянием всех
использованных ксенобиотиков, происходит увеличение суммарной продукции радикалов
(СПР) и содержания малонового диальдегида (МДА) в крови и снижение активности 7

каталазы и пероксидазы. Так, метанол, этиленгликоль, этанол, дихлорэтан,
тетрахлорметан и трихлорэтилен статистически значимо (p<0,05) повышали СПР
соответственно в 2,37; 2,12; 1,54; 3,22; 3,44 и 2,50 раза, а содержание в крови МДА - в
1,31; 1,39; 1,13 (p>0,05); 1,38; 1,51 и 1,33 раза соответственно.
По степени увеличения СПР токсиканты располагались в последовательности:
тетрахлорметан, дихлорэтан, трихлорэтилен, метанол, этиленгликоль и этанол, а по
нарастанию содержания МДА - в порядке: тетрахлорметан, дихлорэтан, трихлорэтилен,
этиленгликоль, метанол и этанол. Существенных различий в увеличении данных
показателей под влиянием ядов не выявлено, за исключением действия дихлорэтана и
этанола. Метанол, этиленгликоль, этанол, дихлорэтан, тетрахлорметан и трихлорэтилен
статистически достоверно (p<0,05) снижали активность каталазы в крови соответственно
в 1,62; 1,50; 1,41; 1,82; 1,95 и 1,76 раза. Аналогичное действие токсиканты оказывали на
активность пероксидазы. Статистически значимых различий в редукции данных
показателей под влиянием различных спиртов и хлорированных углеводородов не
выявлено. При вычислении средней степени активации ПОЛ хлорированными
углеводородами и спиртами установлено, что хлорированные углеводороды инициируют
ПОЛ в 2,01 раза, а спирты - в 1,54 раза (p<0,05).
Изменения показателей ПОЛ в плазме крови, несомненно, отражают процесс
свободно-радикального окисления липидов, как всех клеток различных органов в целом,
так и органов системы иммунитета и, в частности, лимфоцитов. Существуют основания
считать, что стресс-реакция, приводящая к повышению уровня кортикостероидов и
катехоламинов в крови под влиянием ксенобиотиков, может являться одним из факторов,
инициирующим ПОЛ [Меерсон Ф.З., 1984; Валеева И.Х. и соавт., 2002; Зарубина И.В.,
Миронова О.П., 2002].
Обращает на себя внимание то, что активация ПОЛ под влиянием тетрахлорметана
максимальная. Это объясняется высокой активностью радикалов данного соединения,
образующихся при его метаболизме [Тиунов Л.А., 1990].
Коэффициенты корреляции между показателями системы иммунитета (числом АОК
к ЭБ, реакцией ГЗТ) при остром отравлении тетрахлорметаном и суммарной продукцией
радикалов составили соответственно -0,732 (p<0,05) и -0,783 (p<0,05). Коэффициенты
корреляции при острых отравлениях спиртами и хлорированными углеводородами между
АОК к ЭБ, реакцией ГЗТ и содержанием каталазы и пероксидазы в крови крыс составляли
от 0,645 до 0,759. Коэффициенты корреляции между содержанием МДА в крови и 8

показателями иммунного статуса при действии спиртов и хлорированных углеводородов
составляли от -0,639 до -0,769. Значения r между параметрами были статистически
значимы, за исключением показателей, сравниваемых после действия этанола.
Таким образом, под влиянием острой интоксикации спиртами и хлорированными
углеводородами увеличивается функция коры надпочечников и активируется симпатико-
адреналовая система, что сопровождается увеличением концентрации кортикостерона,
адреналина, норадреналина в крови, инициируется перекисное окисление липидов.
Установлена обратная корреляция между показателями иммунных реакций и
параметрами, характеризующими инициацию ПОЛ после острого отравления спиртами и
хлорированными углеводородами. Несмотря на выявленную обратную корреляцию между
гуморальным, клеточным иммунным ответом и концентрациями адреналина и
кортикостерона в крови после острого отравления спиртами и хлорированными
углеводородами иммуносупрессивные эффекты токсикантов не зависят от увеличения
содержания при их действии в плазме крови адреналина и норадреналина, а роль
кортикостерона в формировании постинтоксикационного иммунодефицита
незначительна. Острое отравление хлорированными углеводородами вызывает снижение
активности ацетилхолинэстеразы в Т-лимфоцитах тимуса и селезенки, -нафтил-АS-
ацетатэстеразы и -нафтилбутиратэстеразы в спленоцитах, при этом у дихлорэтана
проявляется максимальный антиэстеразный эффект. Влияние спиртов на активность
эстераз Т-лимфоцитов тимуса и спленоцитов не выявлено. Установлена прямая
корреляция между иммунными реакциями и активностью ацетилхолинэстеразы в Т-
лимфоцитах тимуса, а также содержанием эстераз в спленоцитах после острого
отравления хлорированными углеводородами.

Список литературы

1. Быкова А.А., Сединина Н.С. // Фармакол. и токсикол. - 2002. - N1. - С.85-87.
2. Валеева И.Х., Зиганшина Л.Е., Бурнашова З.А., Зиганшин А.У. // Эксперим. и клин.
фармакол. - 2002. - Т.65, N 2. - С.40-43.
3. Давыдов В.В. // Труды ВмедА. - Л., 1970. - Т.189. - С.85-86.
4. Забродский П.Ф. Иммунотропные свойства ядов и лекарственных средств. - Саратов:
Изд. СГМУ, 1998. - 213 с.
5. Забродский П.Ф. // Эксперим. и клин. фармакол. - 1999б. - Т 62, N3. - С.48-49. 9

6. Забродский П. Ф. // Общая токсикология / Под ред. Б.А. Курляндского, В.А. Филова. -
М.: Медицина, 2002. - С. 352-384.
7. Забродский П.Ф., Германчук В.Г., Нодель М.Л., Василенко О.А., Аредаков А.Н. //
Эксперим. и клин. фармакол. - 2004а. - Т. 67, N5. - С.28-30.
8. Зарубина И.В., Миронова О.П // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 2001. - Т.133, N2. -
С.165-167.
9. Лужников Е.А., Костомарова Л.Г. Острые отравления. - М.:Медицина, 2000. - 434 с.
10. Меерсон Ф.З. Патогенез и предупреждение стрессорных и ишемических
повреждений сердца. - М.: Медицина, 1984. - 272 с.
11. Михальчик Е.В., Иванова А.В., Ануров М.В., Титкова С.М., Пеньков Л.Ю., Коркина
Л.Г. // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 2004. - Т.138, N9. - С.299-301.
12. Тиунов Л.А. // Вредные химические вещества. / Справочник под. ред. В.А. Филова -
Л.: Химия, 1990а.- С. 337-372.
13. Тиунов Л.А. // Вредные химические вещества. / Справочник под. ред. В.А. Филова -
Л.: Химия, 1990б. - С.438-454.
14. Филатова Г.Ф., Кузнецова Г.А., Бобков Ю.Г. // Пат. физиол. и эксперим. терапия. -
1987. - N4. - С.48-50.
15. Хейхоу Ф. Г. Дж., Кваглино Д. Гематологическая цитохимия. - М.: Медицина, 1983.-
319 с.
16. Ширшев С.В. // Бюл. эксперим. биол. и мед. - 1998. - N6. - С.666-669.
17. Delves P.J., Roitt I.M. // N. Engl. J. Med. - 2000. - Vol.343, N2. - P.37-49.
18. Ellman G.M., Countney K.D., Anders V. // Biochem. Pharm. - 1961. - Vol.7, N1. - P.88.
19. Friedman H., Newton C., Klein T.W. // Clin. Microb. Rev. - 2003. - Vol.16. - N2. - P.209-
219.
20. Luster M. J., Blank J. A., Dean J. H. // Annu. Rev. Pharmacol. and Toxicol. - Vol.27. - Palo
Alto, Calif. - 1987. - P.23-49.
21. Moor P., Steeno O. Raskin M., Hendrikx A. // Acta endocrinol. - 1976. - Vol.33, N2. -
P.297-307.

Док. 673532
Опублик.: 29.07.14
Число обращений: 0

  • Забродский Павел Францевич

    • Разработчик Copyright © 2004-2019, Некоммерческое партнерство `Научно-Информационное Агентство `НАСЛЕДИЕ ОТЕЧЕСТВА``